【故事】重逢

标准解析

核苷酸紫外光最大吸收值位于260nm(B对)附近。280nm(A错)为蛋白质的紫外光最大吸收值。

故事情境

沈先生那盏紫灯，照的是“字”的亮——核酸的碱基里有共轭双键，最大吸收在 260nm。他另外读的那个“二百八”，是蛋白的亮，专门用来查卷子有没有沾血、沾手印。题目问核酸，答案只能是 260nm；280nm 是蛋白质的波长，是命题人给记混的人准备的。 **

易错点

① 把 280nm 当成核酸（那是蛋白质、色氨酸、酪氨酸）；② 记成 240nm 或 220nm；③ 忘记 DNA 和 RNA 的最大吸收都在 260nm 附近，不因种类而变。

标准解析

260nm是嘌呤和嘧啶所含共轭双键的最大紫外吸收光值，根据260nm处的吸光度(A260),可以判断出溶液中的DNA或RNA的含量。280nm是色氨酸、酪氨酸所含共轭双键的最大紫外吸收光值，根据280nm处的吸光度(A28o),可以判断出溶液中蛋白质的含量。利用260nm与280nm的吸光度比值(A260 / A?80)(A对)可以判断从生物样品中提取的核酸样品的纯度。DNA纯品的A?6o /Az的比值应为1.8;而RNA纯品的A?6o/A28的比值应为2.0。

故事情境

沈先生验卷，不看字，看两个亮度的比。脱氧纯卷一点八，核糖纯卷二点零；血渍卷一点七，是蛋白掺进来了；油纸包过的卷二点一，是核糖掺进来了。比值就是纯度，Tm、变性时间、GC 含量都不是“纯度”的尺子。 **

易错点

① 把 Tm 当纯度指标（Tm 反映长短与 GC 含量）；② 把 DNA 与 RNA 的纯品比值记反（DNA 1.8、RNA 2.0）；③ 忘记判读方向：低于 1.8 是蛋白污染，高于 2 是 RNA 污染。

标准解析

某些理化因素(温度、pH、离子强度)会导致DNA双链互补碱基对之间的氢键发生断裂，使DNA双链解链为单链，这种现象称为DNA变性。变性破坏了DNA的空间结构，但是没有改变核苷酸序列和性质，因此核酸紫外光吸收的能力和波长不发生变化(BC错)。在DNA解链过程中，有更多的共轭双键得以暴露，含有DNA的溶液在260nm处的吸光度随之增加，这种现象称为DNA的增色效应(A对)。DNA双链变性后解离成单链，分子的对称性消失，故溶液黏度降低(D错)。

故事情境

两片纸一分开，灯下满纸都亮——“藏着的字全露出来了”，这就是增色效应。灯还是那盏紫灯，波长没变，只是亮度上去了。至于黏度，阿秀捏在手里最清楚：先前硬邦邦的，这会儿软塌塌的，是降，不是升。D 项是把蛋白质变性的方向搬了过来。 **

易错点

① 把“吸收增加”误成“波长转移”（波长仍是 260nm）；② 以为变性后就不吸收紫外线了；③ 把 DNA 变性黏度记成升高——那是蛋白质变性的表现。

标准解析

DNA变性是指在某些极端的理化条件(温度、pH、离子强度等)可以断裂DNA双链互补碱基对之间的氢键(B对)以及破坏碱基堆积力，使一条 DNA双链解离成为两条单链的现象。DNA变性后，其双螺旋结构解开，由原本紧密有序的状态变为松散无序的单链状态，因此其溶液的黏度降低(A对)。DNA变性后，双链解开成单链，空间结构变得松散，分子内部的堆积方式发生改变，使得DNA分子的密度增加(C对)。同时，DNA变性后原本隐藏在双链内部的碱基暴露出来，由于嘌呤和嘧啶环中均含有共轭双键，使得DNA分子在260nm处的吸光度增加(D对)。

故事情境

这一题就是拆卷那一幕的四样证据：手里“懈了”（A 黏度降低）；“搭扣”松开（B 氢键断裂）；丢进盐水“松了反倒沉”（C 密度增加）；紫灯下“满纸都亮”（D 260nm 吸光度增加）。四样都发生在同一卷纸上，所以四项全选。 **

易错点

① 漏选 C（密度增加不常被记住）；② 把“氢键断裂”误成“磷酸二酯键断裂”（后者是水解，不是变性）；③ 只选 A、D，把 B、C 当成“结构变化”而非“理化性质改变”——题目问的是变性后发生的改变，四项都算。

标准解析

解链温度(Tm)又称为熔解温度，是指 DNA解链过程中，溶液在260nm处的吸光度达到最大值一半时所对应的温度，在此温度时，50??DNA双链解离成单链(C对)。一般来讲，DNA的Tm值与DNA分子的长短以及碱基的GC含量有关，分子的G+C含量越高，Tm值越高。

故事情境

周掌柜把手伸进铜盆，试了试水温，说“到这个数，一半开了，一半还搭着”——这一半开的温度，就是 Tm。它不是复性的温度（复性要凉下来），不是复制的温度，也不是 B 型转 A 型的温度。 **

易错点

① 把 Tm 记成“全部双链打开”的温度（是 50%，不是 100%）；② 把 Tm 与复性温度混为一谈；③ 只记住“Tm 与 GC 含量有关”，却忘了 Tm 的定义本身。

标准解析

对DNA加热时，两条链的氢键(A=T、G=C)逐渐解离成为单链状态，这种现象称为DNA变性，在DNA变性过程中，260nm(A错)处的紫外吸光度逐渐增加，当紫外吸光度达到最大变化值一半时所对应的温度定义为DNA的解链温度(Tm)或融解温度。在此温度时，50??氢键断裂(C错),即50??DNA双链被打开(D对)。变性的DNA经缓慢冷却后可以复性，复性过程中将不同种类的DNA单链或RNA放在同一溶液中，只要两种核酸单链之间存在一定程度的碱基配对关系，它们就有可能形成杂化双链(B错)。

故事情境

Tm 那一刻，是“一半开了，一半还搭着”——不是所有 CG 的搭扣都断，也不是所有双链都散。杂化双链是“凉下来以后”的事：阿秀把脱氧条、核糖条贴上去，是在复性那一步，不是在加热那一瞬。灯是 260nm 的紫灯，不是 280nm 的蛋白灯。 **

易错点

① 把“50%”记成“全部”，于是错选 C；② 把杂化双链当成 Tm 时的变化（杂化发生在复性/退火过程）；③ 把 260nm 记成 280nm。

标准解析

在DNA解链过程中，紫外吸光度的变化(A260)达到最大变化值的一半时所对应的温度为DNA的解链温度(Tm),Tm值与DNA分子的GC含量有关，G+C含量越高，Tm值越高，反之亦然，这与C=G碱基对之间有3个氢键，A=T碱基对之间仅2个氢键，破坏C=G需要的温度更高有关。在完整的DNA双链中AT含量+CG含量=100所以GC含量，A为80?对),B为40?为30?为50??

故事情境

周掌柜说“三扣的对子多，难拆”。A 项里 A＋T 只占两成，剩下的八成都是三扣的 G≡C，是四卷里最难拆的一卷；B 项 GC 四成，C 项三成，D 项五成，都不如 A。题目问 Tm 最高，先要把“A＋T 含量”换算成“GC 含量”，再比大小。 **

易错点

① 看到“A＋T 20%”就以为 GC 也低，忘了两者相加为 100%；② 直接拿 A＋T 的百分数比大小，选出 B（60%）；③ 忘记 G≡C 有三个氢键、A=T 只有两个，因此 GC 越高 Tm 越高。

标准解析

解链温度(Tm)又称为熔解温度，是指DNA解链过程中，溶液在260nm处的吸光度达到最大值一半时所对应的温度，在此温度时，50??DNA双链解离成单链。一般来讲，DNA的Tm值与DNA分子的长短以及碱基的GC含量有关，分子的GC含量升高(A对),Tm值升高。溶液离子强度高(C对),Tm值越高。温度升高(B错)可促进DNA解链，但不改变核酸分子的Tm值。缓冲液浓度升高会导致溶液离子强度高从而Tm值升高，但并不代表缓冲液浓度改变(D错)会使Tm值升高。 ### 第四章 糖蛋白和蛋白聚糖的结构与功能 ### 第一节 糖蛋白分子中的聚糖 ### 第二节 蛋白聚糖分子中的糖胺聚糖 ### □第三节 聚糖结构蕴藏大量生物信息 ### 第五章 水和无机元素 ### 第一节 水 ### 第二节 无机元素 生物第六章 维生素 ### 第六章 维生素 ### 第一节 脂溶性维生素

故事情境

周掌柜把话说得很死：“火是拆的原因，不是拆的门槛。”火烧旺，卷开得快，但 Tm 还是那个数——所以 B 不能选。盐水里纸贴得紧，Tm 高，C 能选；三扣的对子多，Tm 高，A 能选。至于 D，沈先生也说过一句：药不一样，不能一概说浓了就高。 **

易错点

① 把“升温促进解链”当成“升温提高 Tm”（这是本题最大的陷阱）；② 以为缓冲液浓度一高，离子强度就一定高、Tm 就一定高；③ 漏选 A 或 C，只记住“Tm 与 GC 有关”而忘了离子强度。 ---